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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:293T/17(人胚腎細胞)

  • 產(chǎn)品型號:293T/17
  • 產(chǎn)品廠商:KALANG
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
293T/17(人胚腎細胞)是293T (293tsA1609neo)細胞株的衍生株。 293T 是293細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細胞進行克隆,檢測pBND和pZAP載體,293T/17(人胚腎細胞)得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株,293T/17。細胞持續(xù)表達SV40 大T抗原,而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆。
詳情介紹:

293T/17(人胚腎細胞)

細胞名稱:293T/17    人胚腎細胞

組織來源:腎

培養(yǎng)條件:DMEM +10% FBS

形       態(tài):貼壁;上皮細胞樣

背       景:293T/17細胞株是293T (293tsA1609neo)細胞株的衍生株。 293T 是293細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細胞進行克隆,檢測pBND和pZAP載體,得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株,293T/17。細胞持續(xù)表達SV40 大T抗原,而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆。

293T/17(人胚腎細胞)操作說明:

1)對于常溫運輸?shù)募毎盏郊毎螅瑱z查是否有運輸問題,即細胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細胞培養(yǎng)體系,293T/17(人胚腎細胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。

2)對于干冰運輸?shù)募毎埲〕隼鋬龉芎螅毩⒓捶湃?/span>37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。

293T/17(人胚腎細胞)注意事項:

1)細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 

293T/17(人胚腎細胞)下面介紹幾種細胞培養(yǎng)過程中常見的污染:

)桿菌污染:培養(yǎng)基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。

)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。

)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。

 

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