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產品詳情
  • 產品名稱:HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)

  • 產品型號:HK-2
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7 轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,*后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。
詳情介紹:

HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)

細胞名稱:HK-2    人腎皮質近曲小管上皮細胞

培養條件:MEM +10% FBS

形       態:貼壁;上皮細胞樣

背       景:該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7 轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,*后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。

HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)操作說明:

1)對于常溫運輸的細胞,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養瓶或管是否破損,細胞培養液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細胞培養箱中靜置。嚴格檢查培養箱的參數:溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態穩定后,即可開始后續操作。選用正確的細胞培養體系,HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)嚴格按照說明書的培養條件進行培養。條件允許,培養的前三天內做細胞拍照記錄,通過郵件發送給我們做及時狀態跟蹤。

2)對于干冰運輸的細胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。然后將其復蘇培養,次日更換培養液。

HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)注意事項:

1)細胞漂浮:培養瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養液培養觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當的提高培養基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養過程中若出現細胞分布明顯不均時(即某一區域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養基進行培養。 

HK-2(人腎皮質近曲小管上皮細胞)下面介紹幾種細胞培養過程中常見的污染:

)桿菌污染:培養基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。

)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數情況下是培養用血清。

)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。

 

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