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產品詳情
  • 產品名稱:人腎皮質近曲小管上皮細胞

  • 產品型號:HK-2
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
人腎皮質近曲小管上皮細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,*后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。 細胞特性 1) 來源:正常腎 2) 形態:上皮細胞樣 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性 5) 規格:T75瓶或者1mL凍存 人腎皮質近曲小管上皮細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代
詳情介紹:

人腎皮質近曲小管上皮細胞

貨號 KL013

簡稱 HK-2

細胞數 1×106

規格 1ml/T25

價格 詢價

人腎皮質近曲小管上皮細胞注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。

詳細描述 Description


細胞介紹

該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入HPV-16 E6/E7基因而獲得永生化。將含有HPV-16 E6/E7基因的重組的逆轉錄病毒載體pLXSN 16 E6/E7轉染外生包裝細胞Psi-2,Psi-2細胞產生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA317,*后將PA317產生的病毒顆粒導入正常的腎皮質近曲小管細胞。盡管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418篩選轉導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-2細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-2細胞基因組中含有E6/E7基因。


細胞特性

1)  來源:正常腎

2)  形態:上皮細胞樣

3)  含量:>1x106 個/mL

4)  污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性

5)  規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝


運輸和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T75培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。


細胞用途:僅供科研使用。

 人腎皮質近曲小管上皮細胞                    

細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 培養基:DMEM/F12(1:1,GIBCO)90%, 上等胎牛血清10%,青鏈霉素1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:人腎皮質近曲小管上皮細胞如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.      棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.      加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3.      按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4.      將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。


注意事項:

1. 收到細胞后,人腎皮質近曲小管上皮細胞若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。

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