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產品詳情
  • 產品名稱:Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞

  • 產品型號:100 μl×10管
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
Stbl2是采用大腸桿菌JM109菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,適合于多種插入片段的化學轉化。具有以下特點: ① 更適于不穩定插入片段(正向重復序列,逆轉錄病毒序列等)的克隆; ② 更適于克隆慢病毒載體、甲基化的基因組序列; ③ 利于克隆 DNA 的穩定和高純度質粒 DNA 的提取; ④ Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞不存在lacIqZΔM15,不可用于藍、白斑篩選。 使用pUC19質粒檢測,轉化效率可達109cfu/μg。 Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞基因型:F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB) 。
詳情介紹:

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞產品描述

Stbl2是采用大腸桿菌JM109菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞,適合于多種插入片段的化學轉化。具有以下特點:

 更適于不穩定插入片段(正向重復序列,逆轉錄病毒序列等)的克隆;

 更適于克隆慢病毒載體、甲基化的基因組序列;

 利于克隆 DNA 的穩定和高純度質粒 DNA 的提取;

 不存在lacIqZΔM15,不可用于藍、白斑篩選。

本品使用pUC19質粒檢測,轉化效率可達109cfu/μg

本品基因型:F- mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB) 

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞產品組分

編號

組分

規格

保存溫度

11811-A

 Stbl2 感受態細胞

100 μl × 10

-80

11811-B

pUC1910pg/μl

10 μl × 1

-20

運輸與保存方法

干冰運輸。

 Stbl2 感受態細胞-80保存,pUC19質粒-20保存。有效期半年。

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞注意事項

1)感受態細胞應保存在-80,不可反復凍融和放置時間過長,以免降低感受態細胞的轉化效率。

2)整個轉化操作,嚴格根據相應溫度及無菌條件要求進行。

3)為確保*高轉化效率,整個操作過程應盡量輕柔,并保持低溫。

4)為防止轉化不成功,可以保留部分連接反應液,以重新轉化,*低化實驗可能遇到的風險。

Stbl2 Chemically Competent Cell Stbl2 化學感受態細胞使用方法

1)取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。

【注】:一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μl,可以根據實際情況分裝使用,應注意所用的DNA體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。

2)向100 μl感受態細胞懸液中加入目的DNA,輕輕旋轉離心管以混勻內容物,在冰浴中靜置25min

3)置于42水浴中熱激45 s,然后快速將管轉移到冰浴中,冷卻2-3min,該過程不要搖動離心管,否則會降低轉化效率。

4)向離心管中加入900μl無菌的SOCLB培養基(不含***),混勻后置于30搖床振蕩培養90min225rpm),目的是促使菌體復蘇。

【注】:當質粒中含有不穩定片段時,30培養可降低錯誤重組的概率,若轉化Control pUC19 計算轉化效率,則需37225 rpm復蘇60min

5)將上述復蘇的菌液于5000rpm離心1min,留取100μl左右上清輕輕混勻菌液并涂布到含相應***的SOC培養基上。

6)將平板倒置放于30培養箱過夜培養。

【注】:若轉化control pUC19 計算轉化效率,則需37培養過夜。

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