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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)

  • 產(chǎn)品型號(hào):NIH/3T3
  • 產(chǎn)品廠商:KALANG
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細(xì)胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進(jìn)行轉(zhuǎn)化分析的亞株,建立的NIH/3T3細(xì)胞株又進(jìn)行了5輪以上亞克隆。NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)株對肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。
詳情介紹:

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)

細(xì)胞名稱:NIH/3T3    小鼠胚胎細(xì)胞

組織來源:胚胎

培養(yǎng)條件:DMEM +10% Calf serum

形       態(tài):貼壁;成纖維細(xì)胞樣

背       景:NIH/3T3是從NIH Swiss小鼠胚胎培養(yǎng)物中建立的高度接觸性抑制的連續(xù)傳代細(xì)胞株。為了培育在形態(tài)學(xué)特征上更適合于進(jìn)行轉(zhuǎn)化分析的亞株,建立的NIH/3T3細(xì)胞株又進(jìn)行了5輪以上亞克隆。該細(xì)胞株對肉瘤病毒的轉(zhuǎn)化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)操作說明:

1)對于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運(yùn)輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。

2)對于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)注意事項(xiàng):

1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)下面介紹幾種細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見的污染:

)桿菌污染:培養(yǎng)基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。

)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時(shí)就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。

)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細(xì)胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細(xì)胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。

 

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