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產品詳情
  • 產品名稱:人肺癌細胞

  • 產品型號:A549
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
人肺癌細胞系由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。 細胞特性 1)來源:肺癌 2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長 3)含量:>1x106 個/mL 4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性 5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 人肺癌細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
詳情介紹:

人肺癌細胞

貨號 KL-031

簡稱 A549

細胞數 1×106

規格 1ml/T25

價格 詢價

人肺癌細胞注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。

詳細描述 Description


人肺癌細胞 


細胞介紹

細胞系由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。


細胞特性

1)來源:肺癌

2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長

3)含量:>1x106 個/mL

4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性

5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝


細胞接受后的處理:

1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。

2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。

4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。

5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。


細胞用途:僅供科研使用。

人肺癌細胞                     

本公司的細胞培養操作規程,供參考

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備F-12K培養基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;上等胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。**天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。

3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。

4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。

3)細胞凍存:人肺癌細胞待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為類;

     1,細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

     2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

     3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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滬公網安備 31011702004399號

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