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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人成骨肉瘤細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:Saos-2
  • 產(chǎn)品廠商:KALANG
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
人成骨肉瘤細(xì)胞是J. Fogh和G.Trempe分離和鑒定的眾多人腫瘤細(xì)胞系中的一種。該病人曾經(jīng)多種****,包括RTG. methotrexate, adriamycin vincristine, cytoxan 和 aramycin-C。該細(xì)胞在**抑制小鼠中不致瘤,但在半固體培養(yǎng)基中形成集落。 細(xì)胞特性 1)來源:骨肉瘤、骨 2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣 3)含量:>1x106 個/mL 4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性 5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 人成骨肉瘤細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
詳情介紹:

人成骨肉瘤細(xì)胞

貨號KL-018

簡稱 Saos-2

細(xì)胞數(shù) 1×106

規(guī)格 1ml/T25

價格 詢價

人成骨肉瘤細(xì)胞注意事項:

1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要**后方能丟棄。

詳細(xì)描述 Description


細(xì)胞介紹

該細(xì)胞是J. Fogh和G.Trempe分離和鑒定的眾多人腫瘤細(xì)胞系中的一種。該病人曾經(jīng)多種****,包括RTG. methotrexate, adriamycin vincristine, cytoxan 和 aramycin-C。該細(xì)胞在**抑制小鼠中不致瘤,但在半固體培養(yǎng)基中形成集落。


細(xì)胞特性

1)來源:骨肉瘤、骨

2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣

3)含量:>1x106 個/mL

4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性

5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝


運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

收到細(xì)胞后3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。


細(xì)胞用途:僅供科研使用。

人成骨肉瘤細(xì)胞                     

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備McCoy’s 5A培養(yǎng)基(McCoy's 5A Medium,GIBCO,貨號:16600-082),85%;胎牛血清,15%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%FBS,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:人成骨肉瘤細(xì)胞如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:人成骨肉瘤細(xì)胞待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為類;

     1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

     2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。

     3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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